Проект Института биохимии и генетики УФИЦ РАН «Разработка эффективных инструментов для развития животноводства с использованием генетических технологий и анализа больших данных» посвящен решению ряда амбициозных задач, в том числе связанных с созданием гуманизированных свиней с помощью методов геномного редактирования для ксенотрансплантации органов.
Самым популярным и широко используемым методом CRISPR/Cas редактирования генома свиней является микроинъекция либо электропорация рибонуклеопротеидного комплекса, состоящего из белка Cas и гидовой РНК. Синтез последней – многоступенчатый процесс, от которого во многом зависит успешность редактирования. Обычно синтез осуществляется с плазмиды при помощи фермента Т7 РНК полимеразы. При этом критически важно обеспечивать высокую эффективность остановки транскрипции, что может быть достигнуто путем рестрикции вектора, а также использования более эффективных терминаторов.
Для эффективного редактирования геномов свиней сотрудниками лаборатории геномных и пост-геномных технологий в животноводстве Института биохимии и генетики УФИЦ РАН в первой половине 2025 г. была создана высококопийная плазмида с усовершенствованным Т7-терминатором, куда методом GoldenGate с отрицательной селекцией на стрептомицине в дальнейшем может быть клонирована необходимая последовательность спейсера гидовой РНК. Работоспособность конструкции была проверена методом in vitro CRISPR/Cas9-опосредованного редактирования (ICE) на примере двух гидовых РНК к гену CD163.
Руководителем проекта Мегагранта Министерства науки и высшего образования Российской Федерации № 075-15-2025-014 (№ 075-15-2024-666) является ведущий ученый, Профессор Университета Джунтендо (Токио, Япония) Гусев Олег Александрович (Scopus AuthorID: 55289623600).
Группа лаборатории в VK https://vk.com/labgentech
